在实验应用中，为使细胞系保持稳定特性，不受污染，不丢失，应建立完备的维护体系；

1． 用于建立细胞库的血清应行严格检定，确定无细菌、支原体污染并有好的支持细胞生长能力。

2． 新购入的细胸系或新建系细胞，应在稳定生长后，尽早冻存，以保持较早的代数，使细胞仍具有最初的特性。对于一些杂交瘤细胞系、白血病细胞及其他一些肿瘤细胞，保持较早的代数是非常必要的，长期体外传代易导致变异和特性丢失。有条件应对每个新购入及新建细胞系拍昭片，记录最初形态及生长特性。

3． 建立二库和三库的维护体系。即将第一批冻存的细胞（好每种5-10支），复苏一支确定存活率及无污染后，编号，建立细胞库的总库；第二批冻存的细胞（如5支），复苏一支确定存活率及无污染后，按总库相应编号，冻存建立第二库，如有条件，可建立相对应的第三库。在使用时，首先用第三库细胞，用完后，从第二库复苏一支，扩增后再补充满第三库，由此，从第三库→第二库→种子库次序苏应用，可以保证细胞系在长期应用中，始终保持原有特性。