Protocal：

1.        分离的细胞悬液离心，去上清，加Tris-NH4Cl缓冲液（每1×10⁸细胞加入2-3ml Tris-NH4Cl溶液），轻轻悬起细胞，室温下静置2分钟；

2.        用滴管伸入试管底部，缓慢加入3ml小牛血清垫底，300×g 离心10分钟，吸除上清；

3.        PBS洗细胞二次，即可使用。

注：

1． 小鼠红细胞还可用低渗法溶解，此处不再介绍；

2． 也可用0.83% NH4Cl替代Tris-NH4Cl缓冲液，或用1.66% NH4Cl加入等量细胞悬液溶解红细胞；

3． 用血清垫底离心，可以去除死细胞及细胞碎片，也可以直接离心收集细胞；

4． Tris-NH4Cl作用时间过长，或作用时用力吹打，都会影响细胞活力；

5． 如果仍有明显红细胞，再重复此过程。