一. 蔗聚糖—泛影葡胺(Feicoll-Hypaque)溶液
1. 蔗聚糖――泛影葡胺可使红细胞聚集成串后沉降,及粒细胞沉降,最多用于人外周血单细胞分离,常用400×g,15-30分钟,水平离心;
2. 可用膜滤器除菌,也可用加热高压灭菌;
3. 离心时保持20度效果较为重要,温度过高或过低均影响分离效果;
4. 可用于人外周血、骨髓等分离单个核细胞、E花环、EA细胞分离、肿瘤细胞分离、TIL等分离及死细胞去除等。
二. Percoll分层溶液
1. Percoll可以制备成不同密度使用液,形成不连接密度,用于分离各种不同密度的细胞;也可用转角离心机2000×g转角离心(28度)1小时,产生S形连续梯度,其不同部位的密度可用不同密度的色珠指示,用于分层分离不同密度的细胞;
2. 可高压灭菌,但压力过高可形成胶状,长期储备的原液有时会析出结晶,不影响其使用;
3. 常用于人单核细胞、NK细胞、B淋巴细胞、小鼠低密度细胞、枯否氏细胞等分离。
三. Metrizamide
1. 可用PBS配制不同密度,用于各种细胞分离;但浓度过高易引起细胞聚集。
2. 常用于树突状细胞。