Q:您好!我请教有关RNAfast200(Catalog no.220010)使用中的几个问题:
1,提取细菌总RNA时 OD260/OD280=1.2 蛋白较多,RNA 得率不稳定,50ng /ul。
2,请问最后的洗脱液里有否EDTA.
以上问题请专家指教,非常感激,我现在正在使用该试剂盒,急需您的解答,谢谢!
飞捷答复:
尊敬的客户你好:
提取细菌总RNA时 OD260/OD280=1.2 蛋白较多,RNA 得率不稳定,可能的原因是裂解不够,或者细菌量过大,或者细菌过老;尝试解决的方法是1:细菌培养4-6小时后收集,立即提取,2:细菌量控制在1ml中等浓度菌液每次提取,或者更少,其实所得RNA量足够后继应用,3:RA2加入后混匀2-3分钟,有助于充分裂解,根据菌种不同,可以进一步增加或减少混匀静置时间,根据具体实验结果而定。洗脱液不含EDTA。
祝实验顺利。有结果请与我们进一步联系,告诉我们你的提取问题所在,以利于我们向其它客户提醒,谢谢。
飞捷生物
技术部