Elutefast
小量胶回收试剂盒
保存条件：室温，保质期2年。
技术支持：使用中遇到任何问题或建议，请通过E-mail（question@fastagen.com）与我们的技术支持部门联系，部门的资深分子生物学专家将在2个工作日内给予答复。
性能介绍：
| 回收率 | 80-90% |
| 原理 | 应用硅膜捕获核酸 |
| 处理量 | 80-200mg 凝胶/ 次提取，6μg DNA捕获能力 |
| 凝胶类型 | TAE、TBE配制普通琼脂糖凝胶及低溶点凝胶 |
| 适用范围 | 目的DNA：80bp-10kb |
| 耗时 | 15-20min |
| 洗脱体积 | 20-50μl |
| 特点 | 1. 采用独特的E1裂解液，较目前国内外广泛采用的6M NaI裂解液的溶胶能力更强 2. 加入酸化步骤，增加DNA与膜的结合力 3. 使用特色的膜处理技术，使膜的吸附力增强，回收率更高 |
试剂盒组成 ： (Catalog no. 220070 50 次)
| E1液 | 30ml |
| E2液 | 500μl |
| 洗液 | 60ml（已加有15ml） |
| 洗脱液 | 10ml |
| 内套柱，外套柱 | 50套 |
| 说明书 | 1份 |
操作流程:
实验操作前请先认真阅读“注意事项”
1． 切割下含目的DNA片段的胶块，放入1.5ml eppendorf管中（胶块重量不超过200mg）。
2． 加入E1液450μl， 室温放置10-15 min，或55-60℃水浴5-10min，确保胶块完全溶解。
3． 加入E2液10μl，混匀后立即将全部液体吸入内套管中，离心2min（注意：室温离心，不可低温离心）。
4． 弃去外套管中液体，内套管中加入500 μl洗液，离心1min。再重复此过程洗一次。
5． 取出内套管，弃去外套管中液体，仍然套回内套管，不加洗液，离心1min。
6． 将内套管取出，放入新的eppendorf管中，在膜中央加入洗脱液20-50μl。
7． 室温放置2min（要增加洗脱率或为大片段DNA时，55℃-60℃温浴5min）。
8． 离心1min，获得回收的DNA片段。
注意事项:
1. 试剂盒室温保存，保质期2年。提取时应确保所有试剂为室温。
2. 离心速度均为12,000rpm-14,000rpm，特别注意不可低温离心。以eppendorf 5417离心机为例，12,000rpm＝13,362g，其它类型离心机转速应达到相近的g数。
3. 首次使用时在洗液瓶中加入45ml无污染的分析纯无水乙醇，用后拧紧瓶盖。
4. 在长波紫外灯下切割凝胶，时间不超过30秒。
5. 胶块重量在100-150mg时回收率最高。
6. 对于浓度高的凝胶，放入裂解液前先切成小块以加速裂解，并适当增加裂解时间。
7. 低溶点凝胶加入E1液后室温放置10min，或40℃水浴5-10min。
8. 胶块完全溶解后呈均一性液体。应当确保胶块完全溶解，溶解不完全会大大降低回收率。
9. 每次离心后取出内套管时应小心，避免外套管中液体沾染内套管底部而影响纯化质量。
10. 尽量保证在膜中央加入洗脱液20μl-50μl，低于20μl将不能保证吸附膜被充分浸润；室温放置2min可以洗脱绝大部分DNA。如果要增加洗脱率或为大片段DNA时，可置55℃-60℃ 温浴5min。
11. 洗脱液pH<7.0时会明显降低DNA的洗脱效率，而国内实验室用水大多呈偏酸性，自备洗脱液时应当注意。本试剂盒提供的洗脱液为pH7.6（10mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA）。
12. 回收质量可用OD260/280比值来判断，但电泳检测更为可靠。国内外同类产品OD260/280比值一般在1.1～1.4 之间，本试剂盒所得DNA比值约1.4，比值偏低主要是核酸浓度太低及一些无机离子的存在，不影响其他分子生物学操作。
13. 本试剂盒的突出优点是操作方便快捷。但采用glass milk提取方法，回收率超过95%，对珍贵的少量目的片段，建议使用此方法（我们提供的Elutemilk胶回收试剂盒即采用glass milk方法，回收率高，详细资料请查阅本公司网站www. fastagen.com）。