Elutemilk
小量胶回收试剂盒(glass milk)
保存条件：室温，保质期2年。
技术支持：使用中遇到任何问题或建议，请通过E-mail（question@fastagen.com）与我们的技术支持部门联系，部门的资深分子生物学专家将在2个工作日内给予答复。
性能介绍：
| 回收率 | >95% |
| 原理 | 应用glass milk 捕获核酸 |
| 处理量 | 80-400mg 凝胶/次提取，10μg DNA捕获能力 |
| 凝胶类型 | TAE、TBE配制普通琼脂糖凝胶及低溶点凝胶 |
| 适用范围 | 目的DNA：80bp-10kb |
| 耗时 | 30min |
| 洗脱体积 | 15-50μl |
| 特点 | 特色的EB1液较目前国内外广泛采用的6M NaI方案的溶胶能力更强，并且使目的DNA与glass milk的结合力更强，回收率更高，适于回收极珍贵片断 |
试剂盒组成 ： (Catalog no. 220090 50 次)
| EB1液 | 60ml |
| GM 液 | 1ml（含glass milk，用前充分摇匀） |
| 洗液 | 60ml（已加有15ml） |
| 洗脱液 | 10ml |
| 离心管 | 50个（1.5ml） |
| 说明书 | 1份 |
操作流程:
实验操作前请先认真阅读“注意事项”
1. 切割下含目的DNA片段的胶块，放入1.5ml eppendorf管中（凝胶>300mg放入2ml 管中）。
2. 根据凝胶重量加入EB1液（400μl /100mg凝胶），室温放置10-15 min，或55-60℃水浴5-10min，确保胶块完全溶解。
3. 加入Gm液（开盖前充分摇匀）20μl，充分颠倒混匀10-20次，放置1mim。
4. 离心30s（注意：室温离心，下同），尽量吸干上清，加入EB1液400μl，充分混匀沉淀。
5. 离心30s，尽量吸干上清，加入洗液600μl，充分混匀沉淀。
6. 离心30s，吸弃上清，加入洗液600μl，充分混匀沉淀。
7. 离心30s，尽量吸干上清，55-60℃温浴10min（或室温晾干约20分钟）。
8. 加入洗脱液15-50μl，充分振荡混匀沉淀，室温放置2min（55℃温浴，5min可增加洗脱率）。
9. 离心1min，吸取上清，即为回收的DNA（注意不要搅动沉淀，或用带滤芯的枪头吸取）。
（附：如要充分去除回收产物中的乙醇，可以在步骤6吸干上清后，加入丙酮1ml，充分混匀沉淀，离心30s，吸弃上清，55℃温育器上烘干丙酮约5min，再进入步骤8）。
注意事项:
1. 试剂盒室温保存，保质期2年。提取时确保所有试剂为室温。
2. 离心速度均为12,000rpm-14,000rpm，特别注意室温离心，不可低温离心。以eppendorf 5417离心机为例，12,000rpm＝13,362g，其它类型离心机转速应达到相近的g数。
3. 首次使用时在洗液瓶中加入45ml无污染的分析纯无水乙醇，用后拧紧瓶盖。
4. 在长波紫外灯下切割凝胶，时间不超过30秒。
5. 对于浓度高的凝胶，放入裂解液前先切成小块以加速裂解，并适当增加裂解时间。
6. 低溶点凝胶加入EB1液后室温放置10min，或40℃水浴5-10min。
7. 胶块完全溶解后呈均一性液体。应当确保胶块完全溶解，溶解不完全会大大降低回收率。
8. Gm液放置后glass milk出现沉淀，是正常情况，开盖前先颠倒震动数次直至倒置后底部没有沉淀物，表明已经充分混匀glass milk，立即使用。
9. 加入洗脱液后以振荡器充分振开底部沉淀，再室温放置2min可以洗脱绝大部分DNA。洗脱液pH<7.0时会明显降低DNA的洗脱效率，而国内实验室用水大多呈偏酸性，自备洗脱液时应当注意。本试剂盒提供的洗脱液为pH7.6（10mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA）。
10. 回收质量可用OD260/280比值来判断，但电泳检测更为可靠。国内外同类产品OD260/280比值一般在1.1～1.4 之间，本试剂盒所得DNA比值约1.4，比值偏低主要是核酸浓度太低及一些无机离子的存在，不影响其他分子生物学操作。