NBT | 把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。 | |
酚:氯仿 | 把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris·CI(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01ml/L Tris·CI(pH7.6)液层,保存于4℃。 | 小心:酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的皮肤部位应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。 |
10mmol/L 苯甲基磺酰氟(PMSF) | 用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml (10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml贮存液(100mmol/L)。 | 小心:PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险,一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。 PMSF在水溶液中不稳定,应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmol/L的PMSF水溶液的半寿期大约为35分钟。这表明PMSF溶液调节为碱性(PH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。 |
磷酸缓冲盐(PBS) | 在800ml蒸馏水中溶解8g NaCI、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4、 0.24g KH2PO4,用HCI调节溶液的pH值达7.4,加水定容至1L,在15Ibf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20分钟。保存于室温。 | |
1mol/L乙酸钾(PH7.5) | 将9.82g乙酸钾溶解于20ml纯水(Mill-Q水或相当级别的水)中,用2mol/L乙酸调节pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃。 | |
乙酸钾溶液(用于碱裂解) | 在60ml 50mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。 | |
3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0) | 在800ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2或用稀乙酸调节pH至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 | |
5mol/L NaCI | 在800ml水中溶解292.2g NaCI加水定容至1L,分装后高压灭菌。 | |
10%十二烷基硫酸钠(SDS) | 在900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用。 | SDS的微细晶粒易于扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须灭菌。 |
20×SSC | 在800ml水中溶解175.3g NaCI和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/L NaOH溶液调节pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 | |
20×SSPE | 在800ml水中溶解175.3g NaCI、27.6g NaOH溶液调节pH值至7.4(约需6.5ml 10mol/L NaOH),加水定容至1L,分装后高压灭菌。 | |
100%三氯乙酸 | 在装有500g TCA的瓶中加入227ml水,形成的溶液含有100%(w/v)TCA。 | |
1mol/L Tris | 在800ml水中溶解121.1g Tris碱,加入浓HCI调节PH值至所需值。 PH HCI 7.4 70ml 7.6 60ml 8.0 42ml 应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 | 如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃,并制备质量更好的Tris。 尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极。 Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1℃,PH值大约降低0.03个单位。例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃和37℃的pH值分别为9.5、8.9和8.6。 |
Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/L Tris) | 在800ml蒸馏水中溶解8g NaCI、0.2g KCI和3g Tris碱,加入0.015g酚红并用HCI调pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装后在15lbf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20分钟,于室温保存。 | |
X-gal | X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液。保存于玻璃管或聚丙烯管中,装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 | |