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Eppendorf 质粒纯化:获得高质量的质粒只需9分钟
2003/10/29 20:21:15  飞捷生物
 
FastPlasmid™ Mini Kit
获得高质量的质粒只需9分钟

        Eppendorf FastPlasmid™质粒纯化体系是近30年来质粒纯化的一大突破。它采用了创新的酶学和渗透学专利技术,仅需一步裂解,即可得到高质量DNA产物。与传统的试剂盒相比,实验时间大大缩短至9分钟,极大地简化了离心和移液操作步骤,是分子生物学实验室的理想选择。

产品特性 
  • 快速有效的质粒纯化仅需9分钟

  • 真正的一步裂解法,操作极其简便

  • 极高的DNA纯度,符合下游试验的要求

  • 高得率,重复性好

 

应用
        从1.5至3毫升菌液中提取质粒DNA,所提取的DNA适用于下游的实验:

  • 自动测序

  • 转化

  • 体外转录

  • 连接和克隆

  • 聚合酶链反应(PCR)

  • 限制性酶切



        FastPlasmid™ Mini Kit 仅需一种溶液,三分钟即可完成裂解,且裂解产物澄清,可直接转到离心柱上离心,质粒结合到膜上,用快速离心的方法清洗和洗脱。洗脱的质粒可直接用于下游试验。仅仅需要
9分钟就可完成整个质粒纯化,极大地简化了操作步骤。

        FastPlasmid
可从1.5毫升菌液中获得多达20ug的高拷贝质粒,或10ug的低拷贝质粒。通常,从LB培养基的菌液中获得平均产量为10ug


测试结果

1 :用FastPlasmid™ 小量试剂盒分离的质粒DNA
1-14
MBI Fermentas gene ruler250ng)。
2-13 :从1.5ml HB101菌中提取的pBluescript 质粒DNA,上样量2ml,总洗脱量50ml

 

2 pSV-β-galactosidase的限制性酶切 
   
1.5ml TOP10菌中提取的质粒DNA5个单位的酶用适当的缓冲液和250ng的质粒37C温浴1小时。
1-16: 250ng MBI Fermentas gene ruler
2-15:
未酶切的质粒
3-5 : EcoRI 酶切,预期片段大小为3114 bp3706 bp
6-8
HindIII 酶切,预期片段为6820 bp
9-11
NdeI 酶切,预期片段为743 bp6077 bp
12-14
BamHI 酶切,预期片段为6820 bp

 

图3 :pSV-β-galactosidase的测序图
从TOP10菌中用FastPlasmid™提取的质粒,用Big Dye 3.0测序试剂在ABI3700测序仪上测序。
 


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描述                          货号
FastPlasmid™ Mini, 100 preps               0032 007.653
FastPlasmid™ Mini, 250 preps               0032 007.655

 
 
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