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石蜡切片标本的常规提取方法
2003/10/26 0:18:45  飞捷生物
 

 

方法一:

1.       10微米石蜡切片10-20片放入1.5mleppendorf管中,加入二甲苯至1.5ml37℃放置15分钟,中间摇匀两次。

2.       10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入新鲜二甲苯至1.5ml37℃放置15分钟,中途摇两次。

3.       10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入100%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。

4.       10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入90%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。

5.       10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入80%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。

6.       10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入70%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。

7.       10 000r/min离心5分钟,去上清液,加入生理盐水洗涤两次,离心去上清液。

8.       加入细胞裂解液,60℃保温3-4小时。

9.       加入等体积的酚、氯仿、异戊醇(25241)混合液,摇20分钟,抽提两次。

10.   用两倍体积无水乙醇沉淀DNA,空气干燥后加适量TE溶解DNA4℃贮存备用。

方法二:

在二甲苯两次脱蜡后,离心去上清液,直接放入37℃温箱,开盖让二甲苯挥发,至切片组织发白色,用生理盐水洗两次,加入细胞裂解液按常规方法提取DNA,也可以应用各类核酸纯化试剂盒提取DNA

 

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