方法一:
1. 用10微米石蜡切片10-20片放入1.5ml的eppendorf管中,加入二甲苯至1.5ml,37℃放置15分钟,中间摇匀两次。
2. 10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入新鲜二甲苯至1.5ml,37℃放置15分钟,中途摇两次。
3. 10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入100%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。
4. 10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入90%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。
5. 10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入80%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。
6. 10,000r/min离心5分钟,去上清液,加入70%乙醇至1.5ml,室温下静置10分钟。
7. 10 000r/min离心5分钟,去上清液,加入生理盐水洗涤两次,离心去上清液。
8. 加入细胞裂解液,60℃保温3-4小时。
9. 加入等体积的酚、氯仿、异戊醇(25:24:1)混合液,摇20分钟,抽提两次。
10. 用两倍体积无水乙醇沉淀DNA,空气干燥后加适量TE溶解DNA,4℃贮存备用。
方法二:
在二甲苯两次脱蜡后,离心去上清液,直接放入37℃温箱,开盖让二甲苯挥发,至切片组织发白色,用生理盐水洗两次,加入细胞裂解液按常规方法提取DNA,也可以应用各类核酸纯化试剂盒提取DNA。