DNAfast1000
中量基因组DNA快速抽提试剂盒
适用范围：全血、骨髓、细胞、组织
保存条件：室温，保质期2年。
技术支持：使用中遇到任何问题或建议，请通过E-mail（question@fastagen.com）与我们的技术支持部门联系，部门的资深分子生物学专家将在2个工作日内给予答复。
性能介绍：
l 突破国外同类产品一次提取全血<200μl的限制，每柱最多可轻松处理2ml全血，最适于全血细胞基因组DNA快速抽提用于PCR的扩增。
l 原理是采用独创的分离膜系统，去除红细胞、裂解白细胞、吸附DNA、洗脱在一柱完成，即可以快速滤除红细胞及血浆获得白细胞，同时选择性吸附DNA，滤除RNA及蛋白质，操作步骤少，耗时20-25min。
l 处理组织样本采用独创的网筛方法，快速方便，不需要另外准备匀浆器，或进行危险的液氮处理，可以单次处理较大量的组织样本。
l 不使用酚等有毒试剂，不需proteinase K消化。
l 方法稳定，每次提取都可以成功获得大量DNA：25-75μg/ml全血，30-60μg/1×107细胞，20-60μg/50mg组织。DNA片段分布在8Kb-100Kb之间，OD260/OD280: 1.7-1.9，主要适于PCR, real-time PCR, HLA-typing等。
试剂盒组成: ( Catalog no. 220030 50 次)
| DB1液 | 30ml（仅全血提取时使用） |
| DB2液 | 60ml |
| 洗液 | 60ml（已加有15ml） |
| 洗脱液 | 10ml |
| 内套柱，外套柱 | 50套 |
| 外套柱 | 50套 |
| 钢网，平皿，研磨棒 | 需要时另配（提取组织DNA时用） |
| 说明书 | 1份 |
操作流程:
实验操作前请先认真阅读“注意事项”
1． 样本预处理
a． 抗凝全血及骨髓：100-2,000μl混匀，血液样本中如有血凝块，应予废弃；
b． 组织块：先在平皿中加DB1液500μl，研磨组织通过钢网，收集过网悬液；
c． 培养细胞：悬浮细胞离心后留下细胞团块和上清500μl，充分震荡形成细胞悬液；贴壁细胞加消化液500μl形成单细胞悬液。
2． 吸取<600μl样品加入内套管，离心7,500rpm，1min（全血2ml可再重复上样离心2次）。
3． 取出内套管，放入新的外套管，加入DB1液500μl，离心7,500rpm，1min。
4． 弃去外套管液体后放入内套管，加入DB2液500μl， 立即离心12,000rpm，1min。再重复此步骤一次。
5． 弃去外套管中液体，内套管中加入500 μl洗液，离心1min。再重复此步骤洗一次。
6． 取出内套管，弃去外套管中液体，仍然套回内套管，不加洗液，离心1min。
7． 将内套管取出，放入新的eppendorf管中，加入洗脱液100-200μl，95℃水浴10min。
8． 离心12,000rpm，1min，获得基因组DNA。
注意事项:
1. 试剂盒室温保存，保质期2年。
2. 离心速度：以eppendorf 5417离心机为例，7,500rpm（5,220g），12,000rpm（13,362g），其它类型离心机转速应达到相近的g数。室温离心（注意：不要低温离心）。
3. 首次使用时在洗液瓶中加入45ml无污染的分析纯无水乙醇，用后拧紧瓶盖。
4. 样本单次提取的限量是：全血<2,000μl，培养细胞<1×107，组织 <50mg。DB1液加入内套管中离心1min结束后，如管中仍有液体，表明样本超量导致吸附膜阻塞，放弃此标本，减少上样量重新上样。
5. 洗脱液加入100μl-200μl，低于100μl将不能保证充分洗脱；洗脱液pH<7.0时会明显降低DNA的洗脱效率，而国内实验室用水大多呈偏酸性，自备洗脱液时应当注意。本试剂盒提供的洗脱液为pH7.6（10mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA）。
6. 要处理更小量或更大量的样本时，建议采用其它方法（注：我们提供的DNAfast200、DNAfast500、DNAfast2000、DNAfast5000基因组DNA快速抽提试剂盒，可以满足实验者的不同要求，详细资料请查阅本公司网站www. fastagen.com）。
7. 本试剂盒可以提取白细胞基因组DNA和存在于白细胞胞浆中的病毒DNA，不能提取血浆病毒DNA。
8. 提取的DNA可以放在4℃或-20℃保存，长期应在-80℃分装保存，避免反复冻融。